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          ATCC 血管細胞基礎培養基介紹

          更新時間:2023-08-07      點擊次數:1389

          血管細胞基礎培養基是一種無菌、不含酚紅的液體組織培養基,旨在用作完整 ATCC 原代細胞解決方案系統中的一個組件。血管細胞基礎培養基旨在支持源自正常人大血管的細胞,例如人臍靜脈內皮細胞、主動脈內皮細胞或主動脈平滑肌細胞,以及微血管內皮細胞。此外,為了支持血管系統細胞的增殖和鋪板效率,血管細胞基礎培養基必須補充適當的細胞特異性生長試劑盒。

          一般的

          • 具體應用

          • 血管細胞基礎培養基是一種無菌、不含酚紅的液體組織培養基,旨在用作完整 ATCC® Primary Cell Solutions™ 系統的一個組件。

            該系統旨在支持源自正常人類大血管的細胞,例如人臍靜脈內皮細胞、主動脈內皮細胞或主動脈平滑肌細胞,以及微血管內皮細胞。血管細胞基礎培養基含有必需和非必需氨基酸、維生素、其他有機化合物、微量礦物質和無機鹽。為了支持血管系統細胞的增殖和鋪板效率,血管細胞基礎培養基必須補充適當的細胞特異性生長試劑盒。

            該系統旨在支持源自人類心血管系統的細胞,包括以下細胞類型:

            源自大血管的內皮細胞

            微血管內皮細胞

            源自大血管的平滑肌細胞

            源自心臟的肌肉細胞


            該系統旨在支持源自正常人類大血管的細胞,例如人臍靜脈內皮細胞、主動脈內皮細胞或主動脈平滑肌細胞,以及微血管內皮細胞。血管細胞基礎培養基含有必需和非必需氨基酸、維生素、其他有機化合物、微量礦物質和無機鹽。為了支持血管系統細胞的增殖和鋪板效率,血管細胞基礎培養基必須補充適當的細胞特異性生長試劑盒。

            • 原代心肌細胞;正常,人類,ATCC  PCS-120-010

            • 原代主動脈平滑肌細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-012

            • 原發性冠狀動脈平滑肌細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-021

            • 原發性肺動脈平滑肌細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-023

            • 原代真皮微血管內皮細胞;正常、人類、新生兒、ATCC  PCS-110-010

            • 原代臍靜脈內皮細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-010

            • 原代臍靜脈內皮細胞;正常,人類,混合,ATCC  PCS-100-013

            • 原代主動脈內皮細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-011

            • 原代冠狀動脈內皮細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-020

            • 原代肺動脈內皮細胞;正常,人類,ATCC  PCS-100-022

            1. 慶大霉素-兩性霉素 B 溶液 (ATCC PCS-999-025)

            2. 青霉素-鏈霉素-兩性霉素 B 溶液 ( ATCC PCS-999-002 )

            3. 酚紅 ( ATCC PCS-999-001 )

            4. 微血管內皮細胞生長試劑盒-BBE ( ATCC PCS-110-040 )

            5. 微血管內皮細胞生長試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-110-041 )

            6. 內皮細胞生長試劑盒-BBE ( ATCC PCS-100-040 )

            7. 內皮細胞生長試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-100-041 )

            1. 對于源自大血管的內皮細胞(例如,正常原代人臍靜脈內皮細胞 (HUVEC)、ATCC PCS-100-010、原代臍靜脈內皮細胞;正常、人、混合、ATCC PCS-100-013、原代主動脈內皮細胞Cells,ATCC PCS-100-011),用以下試劑盒之一補充血管細胞基礎培養基:

            2. 對于源自正常人體組織的微血管內皮細胞(例如,原代真皮微血管內皮細胞;正常、人類、新生兒、ATCC PCS-110-010),用以下試劑盒之一補充血管細胞基礎培養基:

            3. 對于源自大血管的平滑肌細胞(例如,原代主動脈平滑肌細胞,ATCC PCS-100-012),用血管平滑肌細胞生長試劑盒(ATCC PCS-100-042)補充血管細胞基礎培養基。

            4. 可選媒體補充:

          處理信息

          • 處理程序

          • 完整生長培養基的制備

            表 1.如果使用內皮細胞生長試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-100-040),請添加每種成分的一定體積: 

            成分

            體積

            最終濃度

            牛腦提取物 (BBE)

            1.0毫升

            0.2%

            重組人EGF

            0.5毫升

            5納克/毫升

            L-谷氨酰胺

            25.0毫升

            10毫米

            硫酸肝素

            0.5毫升

            0.75 單位/毫升

            氫化可de松半琥珀酸酯

            0.5毫升

            1微克/毫升

            胎牛血清

            10.0毫升

            2%

            抗壞血酸         0.5毫升   50微克/毫升

             

                    表 2 . 如果使用內皮細胞生長試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-100-041),請添加每個成分的一定體積:

            成分

            體積

            最終濃度

            重組人VEGF

            0.5毫升

            5納克/毫升

            重組人EGF

            0.5毫升

            5納克/毫升

            rh FGF 堿性

            0.5毫升

            5納克/毫升

            重組人IGF-1

            0.5毫升

            15納克/毫升

            L-谷氨酰胺

            25.0毫升

            10毫米

            硫酸肝素

            0.5毫升

            0.75 單位/毫升

            氫化可de松半琥珀酸酯

            0.5毫升

            1微克/毫升

            胎牛血清

            10.0毫升

            2%

            抗壞血酸

            0.5毫升

            50微克/毫升

             

                   
            表 3
             . 如果使用血管平滑肌生長試劑盒 (ATCC ® PCS-100-042),請添加每個組件的一定體積:

            成分

            體積

            最終濃度

            rh FGF-堿性

            0.5毫升

            5納克/毫升

            重組人胰島素

            0.5毫升

            5微克/毫升

            抗壞血酸

            0.5毫升

            50微克/毫升

            L-谷氨酰胺

            25.0毫升

            10毫米

            重組人EGF

            0.5毫升

            5納克/毫升

            胎牛血清

            25.0毫升

            5%

             

            表 4.如果使用微血管內皮細胞生長試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-110-040),請添加每種成分的一定體積: 

            成分

            體積

            最終濃度

            牛腦提取物 (BBE)

            1.0毫升

            0.2%

            重組人EGF

            0.5毫升

            5納克/毫升

            L-谷氨酰胺

            25.0毫升

            10毫米

            硫酸肝素

            0.5毫升

            0.75 單位/毫升

            氫化可de松半琥珀酸酯

            0.5毫升

            1微克/毫升

            胎牛血清

            25.0毫升

            5%

            抗壞血酸

            0.5毫升

            50微克/毫升

             

                   表 5 . 如果使用微血管內皮細胞生長試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-110-041),請添加每種成分的一定體積:

            成分

            體積

            最終濃度

            重組人VEGF

            0.5毫升

            5納克/毫升

            重組人EGF

            0.5毫升

            5納克/毫升

            rh FGF 堿性

            0.5毫升

            5納克/毫升

            重組人IGF-1

            0.5毫升

            15納克/毫升

            L-谷氨酰胺

            25.0毫升

            10毫米

            硫酸肝素

            0.5毫升

            0.75 單位/毫升

            氫化可de松半琥珀酸酯

            0.5毫升

            1微克/毫升

            胎牛血清

            25.0毫升

            5%

            抗壞血酸

            0.5毫升

            50微克/毫升

             

            表 6.如果使用心肌細胞生長試劑盒 (ATCC ® PCS-120-040),請添加每種成分的一定體積:

            成分

            體積

            最終濃度

            L-谷氨酰胺

            25.0毫升

            10毫米

            胎牛血清

            25.0毫升

            5%

            胎球蛋白

            5.0毫升

            25毫克/毫升

            重組人FGF-b

            0.5毫升

            5納克/毫升

            重組人胰島素

            0.5毫升

            5毫克/毫升

            抗壞血酸

            0.5毫升

            50微克/毫升

            重組人EGF/TGF-b1

            0.5毫升

            5 納克/毫升,30 皮克/毫升

             

            增殖不需要抗菌劑和酚紅,但如果需要可以添加。表 7 總結了添加到完整生長培養基中的每種可選組分的建議體積。

            1. 從冰箱中取出一套生長套件;確保所有組件的蓋子均已擰緊。

            2. 在將生長套件的組件添加到基礎培養基中之前將其解凍。在添加到基礎培養基之前,需要在 37°C 水浴中加熱 L-谷氨酰胺組分并搖動以溶解任何沉淀物。

            3. 從冷藏處獲取一瓶血管細胞基礎培養基 (475 mL)。

            4. 用 70% 乙醇噴灑所有生長套件組件小瓶和基礎培養基瓶的外表面,以凈化它們。

            5. 使用無菌技術并在層流罩或生物安全柜中工作,使用單獨的無菌移液器將表 1、2、3、4 或 5 中所示的每個生長套件組件的體積轉移到基礎培養基瓶中轉移。

          表 7.添加抗菌劑/抗真菌劑和酚紅(可選)

          成分

          體積

          最終濃度

          慶大霉素-兩性霉素B溶液

          0.5毫升

          慶大霉素:10 µg/mL

          兩性霉素 B:0.25 µg/mL

          青霉素-鏈霉素-兩性霉素B溶液

          0.5毫升

          青霉素:10 單位/mL

          鏈霉素:10 µg/mL

          兩性霉素 B:25 ng/mL

          酚紅

          0.5毫升

          33微米

          1. 蓋緊生長培養基的瓶子并輕輕旋轉內容物以確保溶液均勻。請勿用力搖晃,以免產生泡沫。給瓶子貼上標簽并注明日期。

          2. 完整的生長培養基應在 2°C 至 8°C 的黑暗條件下保存(不要冷凍)。在這些條件下儲存時,完整培養基可穩定保存 30 天。 

          冷凍保存

          1. 檢查所有容器是否有泄漏或破損。
          2. 將基礎培養基保存在 2°C 至 8°C 下。不要凍結。避光。使用前加熱介質時,溫度不要超過 37°C。當在 2°C 至 8°C 的黑暗中儲存時,產品在標簽上的有效期內保持穩定。


          細菌和真菌測試:沒有檢測到

          支原體污染:沒有檢測到

          內毒素:< 0.5 EU/毫升

          滲透壓:270±10毫滲透壓/千克

          酸堿度:7.8±0.3

          功能測試:增殖率和形態

          本產品僅供實驗室研究使用。它不適用于任何動物或人類治療用途、任何人類或動物消費或任何診斷用途。


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